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大鼠可溶性CD14(sCD14)elisa试剂盒

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大鼠可溶性CD14(sCD14)elisa试剂盒

大鼠可溶性CD14(sCD14)ELISA试剂盒基于‌双抗体夹心法‌(典型检测范围 ‌0.312–20 ng/mL⁠11‌或‌15.625–1000 pg/mL⁠13‌)定量检测大鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清中的sCD14水平⁠13,在感染性疾病、免疫调节及器官损伤研究中具有以下核心应用与技术规范:


🔬 ‌一、核心应用方向‌

  1. ‌脓毒症与感染性疾病评估‌

    • ‌早期预警标志物‌:革兰阴性菌感染大鼠模型中,血浆sCD14水平在感染后4-6小时显著升高,早于CRP/PCT等传统指标,提示内毒素(LPS)暴露⁠79;

    • ‌免疫失衡监测‌:脓毒症后期sCD14持续升高反映巨噬细胞受体脱落,与单核细胞功能耗竭正相关⁠1416;

  2. ‌免疫调节机制解析‌

    • ‌双重调控LPS信号‌:低浓度sCD14增强LPS-TLR4通路促炎反应,高浓度(>10 μg/mL)则竞争性抑制mCD14阳性细胞的炎症激活⁠911;

    • ‌跨细胞炎症传递‌:内皮细胞等mCD14阴性细胞依赖sCD14介导LPS内吞,驱动局部炎症损伤⁠911;

  3. ‌器官炎症与损伤研究‌

    • ‌肝脏炎症分级‌:慢性肝炎模型中,血清sCD14水平与ALT/AST负相关,提示抗炎调节功能⁠12;

    • ‌急性肺损伤标志‌:支气管肺泡灌洗液(BALF)中sCD14升高,反映肺组织局部巨噬细胞活化⁠12;


⚙️ ‌二、技术规范与操作要点‌

‌参数‌‌要求‌‌关键注意事项‌
‌检测原理‌双抗体夹心法(包被抗sCD14抗体 + HRP标记二抗)⁠23TMB显色,OD<sub>450nm</sub>读数⁠35
‌样本处理‌‌血清/血浆‌:EDTA抗凝(肝素干扰抗原结合⁠13),1000×g离心10–30min⁠15;
‌组织匀浆‌:含蛋白酶抑制剂的PBS(1:9 w/v)冰上研磨⁠35;
‌BALF/尿液‌:3000×g离心10min去除颗粒⁠6
‌禁用肝素抗凝‌⁠13;‌剔除溶血样本‌(血红素模拟LPS活性⁠35);‌尿液需新鲜检测‌(避免sCD14降解⁠6)
‌联合检测‌脓毒症模型:同步CRP、PCT、IL-6⁠714;肝炎模型加测ALT、AST及TLR4通路基因⁠1213肺损伤研究建议联合BALF中TNF-α、中性粒细胞计数⁠12

💎 ‌三、典型实验设计‌

‌研究方向‌‌模型/样本类型‌‌联合检测指标‌
‌脓毒症早期预警‌大肠埃希菌腹腔注射模型⁠714血浆sCD14↑(4h) + PCT↑(12h) + 存活率↓⁠714
‌LPS跨细胞激活‌内皮细胞-巨噬细胞共培养⁠911sCD14↑ + 内皮细胞IL-6↑ + 单核细胞TLR4活化⁠911
‌慢性肝炎免疫调节‌HBV转基因大鼠模型⁠12血清sCD14↓ + ALT↓ + HBsAg清除率↑⁠12

️ ‌四、注意事项‌

  1. ‌操作关键点‌:

    • 标准品梯度稀释后≤2小时内使用(活性衰减⁠34);终止反应后30分钟内检测OD值⁠45;

  2. ‌生物学干扰‌:

    • ‌动态范围验证‌:极高浓度样本需稀释至线性区间(如脓毒症晚期血浆⁠14);

    • ‌浓度依赖性功能‌:实验设计中需明确sCD14阈值(促炎 vs 抗炎⁠9);

  3. ‌应用限制‌:

    • ‌仅限科研用途‌⁠13,不可用于临床诊断⁠5;


📌 ‌总结‌

该试剂盒核心应用于:

  • ‌感染免疫监测‌(sCD14作为脓毒症早期标志及免疫耗竭指标⁠714);

  • ‌LPS信号解析‌(揭示跨细胞炎症传递与双向调控机制⁠911);

  • ‌器官损伤评估‌(量化肝肺等组织炎症活动度⁠12)。
    操作核心:规避肝素/溶血干扰⁠13,区分血清/血浆差异(血清水平更高⁠1),联合LPS通路相关分子揭示病理机制⁠913。

‌注‌:sCD14是巨噬细胞表面mCD14脱落或分泌的可溶形式⁠811,通过结合LPS并递送至TLR4受体,在感染、自身免疫及器官损伤中扮演"炎症开关"角色⁠911。


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