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大鼠脂肪酸转运蛋白1(FATP1)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠脂肪酸转运蛋白1(FATP1)elisa试剂盒

🔬 ‌检测原理与性能指标‌

  1. ‌双抗体夹心法‌
    预包被抗大鼠FATP1抗体捕获样本抗原,加入HRP标记二抗催化TMB显色,通过450 nm吸光度(OD值)定量分析浓度15。

    • 基础范围:0.156–10 ng/mL(博尔森、泽叶、梵态生物)13

    • 扩展范围:0.625–20 ng/mL(梵态生物)37

    • 常规灵敏度:0.071 ng/mL(博尔森生物、泽叶生物)14

    • 宽范围检测:0.156–10 ng/mL(主流品牌通用范围)14

    • ‌灵敏度‌:

    • ‌检测范围‌:

    • ‌精密度‌:板内/板间变异系数(CV)<10%16。

    • ‌特异性‌:不与大鼠其他脂肪酸结合蛋白交叉反应35。


    🧪 ‌样本处理规范‌

    ‌样本类型‌‌关键操作步骤‌
    ‌血清‌室温凝固10–20分钟,2000–3000 rpm离心20分钟,避免溶血12。
    ‌血浆‌EDTA/肝素抗凝,2–8℃下1000×g离心15分钟;含沉淀需二次离心13。
    ‌组织匀浆‌按1:9(w/v)加预冷PBS(含蛋白酶抑制剂)匀浆,5000×g离心5–10分钟取上清35。
    ‌细胞上清‌1000–3000 rpm离心10分钟去除颗粒物;胞内检测需反复冻融裂解38。
    ‌保存要求‌分装后-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融;检测前室温平衡13。

    ⚠️ ‌注意事项‌:

    • NaN₃抑制HRP活性,避免使用含NaN₃样本15。

    • 溶血/高脂样本需超速离心预处理或弃用17。


    ️ ‌操作流程要点‌

    1. ‌试剂保存‌

      • 未开封试剂盒:2–8℃避光保存(有效期6个月),TMB显色液严格避光13。

    2. ‌标准化步骤‌

      • 孵育条件:37℃恒温60–90分钟(不同品牌存在差异)15。

      • 洗涤要求:≥5次,每孔注满洗涤液以减少背景干扰13。

    3. ‌结果计算‌

      • 绘制7点标准曲线(1:2梯度稀释),样本与标准品需设双复孔38。


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