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大鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)elisa试剂盒

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大鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白4(FABP4)elisa试剂盒

🔬 ‌检测原理与性能指标‌

  1. ‌双抗体夹心法‌
    预包被抗大鼠FABP4抗体捕获样本抗原,加入酶标二抗催化TMB显色,通过450 nm吸光度定量分析浓度15。

    • 常规范围:3.12–200 ng/mL(博尔森生物、菲恩生物)16

    • 宽范围:0.25–8 ng/mL(化邦生物)9

    • ‌灵敏度‌:0.25–1.875 ng/mL(化邦生物灵敏度0.25 ng/mL;菲恩生物灵敏度1.875 ng/mL)67。

    • ‌检测范围‌:

    • ‌精密度‌:板内/板间变异系数(CV)<10%36。

    • ‌特异性‌:不与大鼠其他脂肪酸结合蛋白交叉反应35。


🧪 ‌样本处理规范‌

‌样本类型‌‌关键操作步骤‌
‌血清/血浆‌使用EDTA/肝素抗凝,2000–3000 rpm离心10–20分钟,避免溶血和高脂血13。
‌组织匀浆‌按1:9(w/v)加预冷PBS(含蛋白酶抑制剂)匀浆,3000–5000×g离心取上清59。
‌细胞上清‌离心去除颗粒物;胞内检测需反复冻融裂解细胞35。
‌保存要求‌分装后-20℃或-80℃冻存,避免反复冻融;检测前室温平衡13。

⚠️ ‌注意事项‌:NaN₃抑制HRP活性;溶血/高脂样本需超速离心预处理58。


⚙️ ‌操作流程要点‌

  1. ‌试剂保存‌

    • 未开封试剂盒:2–8℃避光保存(有效期6个月),TMB需严格避光15。

  2. ‌标准化步骤‌

    • 孵育条件:37℃恒温60–90分钟(不同品牌存在差异)15。

    • 洗涤要求:≥5次,每孔注满洗涤液以减少背景干扰35。

  3. ‌浓度计算‌

    • 绘制7点标准曲线(1:2梯度稀释),样本与标准品设双复孔38。


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