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大鼠肿瘤坏死因子α受体(TNFαR)elisa试剂盒 |
双抗夹心法原理
试剂盒采用双抗体夹心ELISA技术:预包被抗体捕获样本中的TNFαR,加入酶标抗体形成复合物,经酶催化底物(如TMB)显色,通过OD值(450nm)定量目标蛋白浓度47。
标记物与检测系统
常用标记物包括HRP(辣根过氧化物酶)与链霉亲和素-生物素系统,提高检测灵敏度912。
适用样本类型:
血清(避免溶血,3000rpm离心10分钟分离)
EDTA/肝素抗凝血浆(3000rpm离心30分钟)
组织匀浆(生理盐水捣碎后离心取上清)
细胞培养上清液(离心去除颗粒物)14。
保存要求:
样本需分装后于-20℃冻存,避免反复冻融;检测前充分解冻混匀714。
炎症机制研究
分析类风湿关节炎、炎症性肠病等模型中TNFαR表达水平,探究TNF-α信号通路激活机制36。
药物疗效评估
用于抗炎药物或TNF-α抑制剂(如抗体药物)的体内外药效学评价,监测受体浓度动态变化313。
免疫调控实验
在感染、创伤模型中检测免疫细胞(如巨噬细胞、淋巴细胞)表面TNFαR的表达调控1215。
试剂保存:
未开封试剂盒需2–8℃保存(保质期约6个月),显色剂避光59。
干扰规避:
避免使用NaN₃防腐样本(抑制HRP活性)7。
高脂血/溶血样本需预处理15。
标准化流程:
严格按说明书控制温育时间(通常37℃ 60分钟)及洗涤次数(≥5次),防止非特异性结合47。