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大鼠肿瘤坏死因子β（TNF-β）elisa试剂盒 |
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A[样本预处理] --> B{类型}
B -->|血清/血浆| C[抗凝→离心]
B -->|组织| D[PBS匀浆→离心]
C & D --> E[稀释至线性范围]
E --> F[加样→37°C孵育120min]
F --> G[洗涤]
G --> H[加检测溶液A→37°C 60min]
H --> I[加酶标二抗→37°C 60min]
I --> J[TMB避光显色15-30min→终止]
J --> K[450nm读值]⚠️ 关键注意事项
干扰控制：
禁用含NaN₃防腐剂（抑制HRP活性）47；
高脂/溶血样本需 10,000×g超速离心20分钟，或采用脂质去除试剂处理46；
操作要点：
显色阶段严格避光，单孔加样时间差≤10分钟38；
标准品梯度稀释建议范围：62.5–4000 pg/mL（7-8个浓度点）1225；
洗涤不充分易导致假阳性，需彻底清洗3-5次（每次浸泡1-2分钟）28；
应用限制：
仅限科研用途，临床诊断需专用验证试剂盒14；
