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小鼠补体片段 5b(C5b)ELISA试剂盒

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Product serial number
H-04-06-M05
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-
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1
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小鼠补体片段 5b(C5b)ELISA试剂盒

‌一、核心应用方向‌

  1. ‌补体终末通路激活评估‌

    • ‌膜攻击复合物(MAC)形成监测‌:定量血清或组织中的C5b水平,反映C5b-9复合物组装程度,揭示补体介导的细胞溶解机制(如溶血性疾病模型)38;

    • ‌炎症性疾病机制研究‌:检测肾小球肾炎、类风湿关节炎等模型C5b表达升高,解析其通过促进炎症因子释放加剧组织损伤的作用78;

  2. ‌组织损伤与修复研究‌

    • ‌缺血再灌注损伤分析‌:定量心肌/脑缺血模型局部C5b沉积水平,评估补体系统激活程度与组织损伤的关联79;

    • ‌神经退行性疾病‌:监测阿尔茨海默病模型中C5b介导的神经元损伤,探索补体抑制剂治疗潜力7;


‌二、技术操作规范‌

‌参数‌‌要求‌
‌样本类型‌血清、血浆(肝素/EDTA抗凝)、组织匀浆(肾脏/脑/心脏)、细胞裂解液14;
‌样本预处理‌▶ ‌体液样本‌:‌3,000×g离心15分钟‌彻底去除细胞碎片(避免溶血干扰)14;
▶ ‌组织匀浆‌:冰生理盐水匀浆→ ‌3,000×g离心10分钟‌取上清4;
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:固相抗体捕获C5b → HRP标记二抗→ TMB显色(‌450nm读值‌)24;
‌检测性能‌‌灵敏度0.05–0.31 ng/mL‌(线性范围0.312–20 ng/mL)24;
‌关键质控点‌▶ 终止反应后‌15分钟内完成检测‌(防显色衰减)14;
▶ 洗涤后彻底拍干孔板(降低背景干扰)14;
▶ 标准品需‌室温平衡后梯度稀释‌(确保准确性)4;
mermaidCopy Codegraph LR
    A[补体激活] --> B{C5裂解}
    B --> C[C5b片段释放]
    C --> D[与C6-C9形成MAC]
    D --> E[细胞溶解/组织损伤]

‌三、注意事项‌

  1. ‌样本保存要求‌:

    • 分离后血清需‌-80℃分装保存‌,反复冻融≤3次(避免蛋白降解)14;

  2. ‌干扰规避‌:

    • ‌严格禁用溶血样本‌(血红蛋白干扰显色)14;

    • 脂血样本需12,000×g超速离心澄清4;

  3. ‌应用限制‌:

    • ‌仅限科研用途‌(非临床诊断),需结合免疫组化定位C5b组织分布78;

    • 需同步检测C5a等上游片段以明确补体激活途径37;


‌总结‌:该试剂盒通过高灵敏度定量C5b片段,主要用于补体终末通路激活机制(MAC形成)、炎症性疾病及缺血/神经损伤模型研究37。操作需严格把控样本预处理规范(尤其避免溶血)、离心参数及显色时效性14。前沿研究提示C5b-9复合物可作为补体过度激活的治疗靶点89。


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