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小鼠铁蛋白重链(FTH)ELISA试剂盒

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H-04-06-M05
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-
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小鼠铁蛋白重链(FTH)ELISA试剂盒

‌一、核心科研应用方向‌

  1. ‌铁代谢与氧化应激研究‌

    • ‌铁稳态调控机制‌:定量肝/脾组织FTH水平,解析其储存游离铁、抑制铁催化芬顿反应的作用,评估氧化损伤模型中铁过载与组织损伤的关联16;

    • ‌基因调控模型验证‌:结合铁调素(Hepcidin)敲除小鼠,分析FTH响应铁离子浓度波动的表达动态15;

  2. ‌肝脏疾病模型分析‌

    • ‌肝纤维化与损伤评估‌:检测肝炎或肝硬化模型中FTH表达升高,揭示其作为肝细胞保护性应答标志物的价值110;

  3. ‌神经退行性疾病研究‌

    • ‌脑铁沉积病理机制‌:定量脑组织匀浆FTH,探索其在阿尔茨海默病模型中对神经元铁死亡的调控作用1;


‌二、技术操作规范‌

‌参数‌‌要求‌
‌适用样本类型‌血清、血浆、肝/脑组织匀浆、细胞培养上清12;
▶ ‌预处理要求‌:
- ‌组织样本‌:液氮速冻→PBS匀浆→‌3,000×g离心10分钟‌取上清(加蛋白酶抑制剂)15;
- ‌体液样本‌:血清/血浆需‌3,000×g离心10-30分钟‌去除颗粒物,避免溶血/高脂血干扰210;
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:固相抗FTH捕获抗体 → 样本孵育 → HRP/生物素标记检测抗体 → TMB显色(‌450 nm读值‌)13;
‌检测范围与灵敏度‌‌0.312–20 ng/mL‌(灵敏度≤0.19 ng/mL)或 ‌62.5–4,000 pg/mL‌(灵敏度<5 pg/mL),具体依试剂盒型号而定16;
‌关键质控点‌▶ 终止反应后‌30分钟内完成OD检测‌(防显色衰减)6;
▶ 彻底洗涤微孔板(手工洗板≥5次,自动洗板350μL/孔×5次)36;
▶ ‌血浆样本需稀释5倍‌检测(降低基质干扰),结果浓度×5换算10;
mermaidCopy Codegraph TB
    A[铁离子积累] --> B{FTH功能}
    B --> C[结合游离铁→抑制氧化损伤]
    B --> D[铁存储缓冲→维持铁稳态]
    C --> E[减轻肝细胞/神经元损伤]
    D --> F[调控铁代谢基因表达]

‌三、注意事项‌

  1. ‌样本干扰规避‌:

    • ‌溶血/高脂样本必须弃用‌(血红蛋白吸光度干扰;脂质影响抗原-抗体结合)210;

    • 避免使用含‌叠氮钠(NaN₃)‌ 的缓冲液(抑制HRP活性)17;

  2. ‌试剂盒选择验证‌:

    • 确认抗体对‌小鼠FTH1‌(Uniport ID: P09528)的特异性,区分人源交叉反应风险15;

  3. ‌应用边界说明‌:

    • ‌仅限科研用途‌(不可用于临床诊断),结果需结合普鲁士蓝铁染色或Western Blot验证410;


‌总结‌:该试剂盒适用于小鼠铁代谢紊乱、肝脏疾病及神经退行性疾病研究,核心价值在于量化 ‌“铁负荷-FTH表达-氧化损伤”‌ 调控轴16。操作中需严格规避溶血样本,规范血浆稀释倍数及浓度换算逻辑25。


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