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小鼠趋化因子 C-X3-C-基元配体 1(CX3CL1)ELISA试剂盒

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H-04-06-M05
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小鼠趋化因子 C-X3-C-基元配体 1(CX3CL1)ELISA试剂盒

‌一、核心科研应用方向‌

  1. ‌神经炎症与神经元损伤研究‌

    • ‌小胶质细胞-神经元互作解析‌:定量脑组织匀浆或脑脊液中CX3CL1水平,揭示其通过结合CX3CR1受体调节小胶质细胞激活状态,影响神经元存活与突触修剪的机制6;

    • ‌神经退行性疾病模型‌:结合阿尔茨海默病模型,评估CX3CL1/CX3CR1轴在β-淀粉样蛋白清除中的作用及其对认知功能的保护效应6;

  2. ‌免疫微环境与疾病进展‌

    • ‌自身免疫性疾病机制‌:检测类风湿关节炎或多发性硬化模型中CX3CL1表达,阐明其招募自然杀伤细胞(NK细胞)和单核细胞浸润组织的病理机制46;

    • ‌肿瘤免疫逃逸研究‌:分析肿瘤微环境中CX3CL1通过抑制T细胞活性促进免疫耐受的调控通路6;

  3. ‌血管内皮功能调控‌

    • ‌动脉粥样硬化模型‌:验证CX3CL1介导单核细胞黏附于血管内皮的过程,促进斑块形成的分子路径6;


‌二、技术操作规范‌

‌参数‌‌要求‌
‌适用样本类型‌血清、血浆、脑脊液、组织匀浆(脑/肿瘤)、细胞培养上清13;
▶ ‌预处理要求‌:
- ‌组织样本‌:液氮速冻后PBS匀浆,‌3,000×g离心10分钟‌取上清(添加蛋白酶抑制剂)13;
- ‌体液样本‌:离心去除颗粒物(3,000×g×10 min),-70℃分装冻存(冻融≤3次)13;
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:固相抗CX3CL1捕获抗体 → 样本孵育 → 生物素标记检测抗体 → 亲和素-HRP → TMB显色(‌450 nm读值‌)16;
‌检测范围与灵敏度‌‌0.32–20 ng/mL‌(灵敏度≤0.19 ng/mL),标准品需倍比稀释(0.156–10 ng/mL)16;
‌关键质控点‌▶ 终止反应后‌30分钟内完成OD检测‌(防显色过饱和)13;
▶ 彻底洗涤微孔板(残留液体增加背景值),推荐洗涤≥5次13;
▶ 避免使用含叠氮钠(NaN₃)或硫柳汞的样本/稀释液(抑制HRP活性)17;
mermaidCopy Codegraph LR
    A[CX3CL1释放] --> B(结合CX3CR1受体)
    B --> C{下游效应}
    C --> D[激活小胶质细胞→神经炎症]
    C --> E[招募NK细胞→组织损伤]
    C --> F[促进单核细胞黏附→血管病变]
    D --> G[神经退行性病变进展]
    E --> H[自身免疫反应加剧]
    F --> I[动脉粥样硬化形成]

‌三、注意事项‌

  1. ‌样本干扰规避‌:

    • ‌溶血/高血脂样本需弃用‌(血红蛋白干扰吸光度,脂质影响抗原结合)13;

    • 组织匀浆离心后取上清需透明无悬浮物3;

  2. ‌试剂盒兼容性风险‌:

    • 不同品牌抗体可能针对人/小鼠不同表位,需确认抗体对小鼠CX3CL1(Uniport ID: O35188)的特异性6;

  3. ‌应用边界说明‌:

    • ‌限于科研用途‌(不可用于临床诊断),结果需结合流式细胞术或免疫荧光验证细胞定位46;


‌总结‌:该试剂盒适用于小鼠神经炎症、自身免疫病及肿瘤微环境研究,核心价值在于量化 ‌“CX3CL1-CX3CR1-免疫细胞招募”‌ 调控轴46。操作中需严格规避溶血样本干扰,并优先验证抗体种属特异性13。


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