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牛早期分泌抗原靶6(ESAT-6;CFP-10)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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牛早期分泌抗原靶6(ESAT-6;CFP-10)elisa试剂盒

🔬 牛ESAT-6/CFP-10 ELISA试剂盒的核心应用

‌一、牛结核病(BTB)精准诊断‌

  1. ‌特异性感染鉴别‌
    检测血清或组织样本中ESAT-6/CFP-10融合蛋白含量,可区分牛分枝杆菌感染与卡介苗(BCG)接种反应(非致病分枝杆菌缺乏该蛋白)35。

  2. ‌替代传统PPD检测‌
    相较于提纯结核菌素(PPD),融合蛋白抗原检测特异性显著提升(‌>95%‌),避免假阳性干扰36。

⚙️ ‌二、免疫机制研究‌

  1. ‌细胞免疫应答评估‌
    联合γ-干扰素释放试验(如ELISPOT),定量分析感染牛体内特异性T淋巴细胞活化水平,灵敏度达 ‌每百万细胞5-50个斑点‌25。

  2. ‌新型抗原开发验证‌

    • ‌铁蛋白融合抗原‌:ESAT-6-CFP-10-BFH融合蛋白可提升皮试反应灵敏度,优化诊断效率7;

    • ‌多方法学对比‌:与皮肤变态反应、IFN-γ释放试验结果高度符合(‌符合率≥90%‌)67。


📊 ‌技术参数与操作规范‌

‌项目‌‌技术说明‌
‌检测原理‌双抗体夹心法(预包被抗融合蛋白抗体→样本→酶标二抗→TMB显色)14
‌检测范围‌‌0.312–20 ng/mL‌(最低检出限0.122–0.264 ng/mL)45
‌适用样本‌牛血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清13

‌注意事项‌

  • ‌样本处理‌:

    • 血清/血浆需无溶血、无脂浊,3,000×g离心10分钟分离4;

    • 避免反复冻融(‌≤3次‌),长期保存需 ‌-20℃分装‌14。

  • ‌干扰规避‌:
    禁用含叠氮钠防腐剂样本(抑制HRP活性)14。

‌注‌:本品标注“‌仅供科研使用‌”(如畜牧疫病研究、疫苗开发),不可用于临床诊断14。


💡 ‌典型应用场景‌

‌研究方向‌‌关键价值‌
‌结核感染早期筛查‌特异性识别致病性分枝杆菌感染35
‌疫苗免疫效果评价‌监测免疫牛群抗原特异性抗体动态57
‌诊断方法优化‌开发高灵敏度融合抗原(如铁蛋白骨架增强型)7

‌技术流程图‌

mermaidCopy Codegraph LR
A[样本离心处理] --> B[加样至预包被板]
B --> C[37℃孵育→洗板]
C --> D[加酶标二抗→孵育]
D --> E[TMB显色→终止]
E --> F[OD450nm读数]


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