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牛肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)elisa试剂盒 |
以下是牛肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)ELISA试剂盒的核心应用与技术规范总结:
炎症信号通路研究
定量检测牛血清、血浆或组织匀浆中TRAF6浓度,解析Toll样受体(TLR)和IL-1受体信号通路的激活状态,评估细菌感染(如乳腺炎、肺炎)引起的免疫应答强度14。
免疫细胞功能分析
监测巨噬细胞、树突细胞中TRAF6表达动态,揭示其在抗原呈递和炎症因子释放中的调控作用35。
疾病模型机制探索
感染或肿瘤模型中TRAF6显著升高(>健康值2倍)提示NF-κB通路异常激活,为干预靶点筛选提供依据35。
样本预处理:
组织匀浆:按1:9(w/v)加生理盐水匀浆→10,000×g离心20分钟4;
避免溶血:血清血红蛋白≤0.2 g/dL,高溶血样本导致假阳性5。
试剂稳定性:
未开封试剂盒4℃保存(有效期6个月),标准品需-20℃分装冻存35。
标准品配制
复溶后梯度稀释至 0–100 ng/mL(现配现用),反复冻融会导致活性损失>15%510。
干扰规避
高脂样本(甘油三酯>150 mg/dL)需超速离心去除脂质层4。
显色控制
TMB避光显色≤15分钟,终止后10分钟内完成450 nm读数35。
注:本品明确标注“仅供科研使用”(如畜牧疾病机制研究、免疫通路分析),不可用于临床诊断12。
检测流程图
mermaidCopy Codegraph TD
A[样本采集] --> B{预处理}
B -->|组织| C[生理盐水1:9匀浆→离心]
B -->|血清/血浆| D[3,000×g离心]
C & D --> E[取50 μL加样→37℃孵育60分钟]
E --> F[洗板→加生物素化抗体]
F --> G[37℃孵育60分钟→洗板]
G --> H[加酶结合物→显色终止]
H --> I[OD450读数]