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牛主要组织相容性复合体(MHC)elisa试剂盒 |
以下是牛主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒的核心应用与技术规范总结:
免疫应答监测
定量检测牛血清、血浆或组织匀浆中MHCⅡ表达水平,评估抗原呈递细胞(如树突细胞、巨噬细胞)活性,解析病原感染(如牛结核病、乳腺炎)后的免疫激活状态13。
疫苗效力评价
分析免疫后外周血单核细胞中MHC表达动态,量化疫苗诱导的细胞免疫应答强度,优化畜牧疫苗免疫程序23。
疾病机制研究
乳腺炎或呼吸道疾病模型中,病变组织MHCⅡ显著升高(>健康组2倍),提示局部免疫细胞浸润与抗原处理能力增强34。
样本预处理:
组织匀浆:按1:9(w/v)加生理盐水匀浆后离心(10,000×g,20分钟)34;
乳汁样本:需4℃ 3,000×g离心15分钟去除脂质层4;
避免溶血:血清血红蛋白≤0.2 g/dL,否则导致假性升高36。
试剂稳定性:
未开封试剂盒4℃保存(有效期6个月),拆封后标准品需-20℃分装冻存25。
标准品梯度:复溶后按2倍稀释至 0–100 ng/mL(现配现用)36。
孵育控制:37℃孵育90分钟 → 洗板2次 → 加生物素化抗体60分钟36。
显色终止:TMB避光显色≤30分钟,终止后10分钟内完成450 nm读数36。
注:本品明确标注"仅用于科研"(如疫苗研发、畜牧免疫研究),不可用于临床诊断12。
检测流程图
mermaidCopy Codegraph LR
A[样本采集] --> B{预处理}
B -->|组织| C[生理盐水1:9匀浆→10,000×g离心]
B -->|乳汁| D[3,000×g离心去脂层]
B -->|血清/血浆| E[直接3,000×g离心]
C & D & E --> F[取100 μL加样→37℃孵育90分钟]
F --> G[洗板→加生物素化抗体60分钟]
G --> H[洗板→加酶结合物30分钟]
H --> I[洗板→TMB显色→终止→读数]