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牛组织多肽抗原(TPA)elisa试剂盒 |
以下是牛组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒的核心应用与技术规范总结(基于双抗体夹心法原理)12:
肿瘤增殖监测
检测血清或组织匀浆中TPA水平(健康牛参考值 <10 ng/mL),>20 ng/mL 提示肿瘤细胞异常增殖(如乳腺癌、消化道肿瘤),用于早期肿瘤筛查模型构建45。
癌症预后评估
治疗后血清TPA下降 >30% 提示治疗有效,持续升高(>50 ng/mL)则预示复发风险升高45。
细胞增殖机制研究
体外培养细胞上清液中TPA动态变化反映细胞分裂活跃度,用于抗增殖药物筛选实验25。
样本处理:
血清/血浆:3000×g离心10分钟去除纤维蛋白12;
组织匀浆:生理盐水1:9(w/v)研磨后10,000×g离心取上清5;
细胞上清:直接离心去除杂质2。
时效性:
分离后样本2小时内检测,-80℃冻存≤3个月(反复冻融≤3次)5。
加样流程
样本体积仅需 10 μL,加40 μL稀释液(最终稀释倍数5倍)5;
标准品梯度覆盖 0–500 ng/mL(冻干品复溶后梯度稀释)2。
显色控制
TMB避光显色 ≤15分钟,450 nm读数需在终止后10分钟内完成12;
浓缩洗涤液按1:20稀释防结晶堵塞2。
干扰规避
溶血样本(Hb>0.2 g/dL)需重新采集1;
脂血样本(甘油三酯>150 mg/dL)超速离心澄清5。
注:本试剂盒仅限于科研用途(如牛肿瘤模型研究、细胞增殖机制分析),不可用于临床诊断12。
检测流程图
mermaidCopy Codegraph LR
A[样本采集] --> B{预处理}
B -->|血清/血浆| C[离心去除杂质]
B -->|组织| D[生理盐水匀浆→离心]
B -->|细胞上清| E[直接离心]
C & D & E --> F[加稀释样本至预包被板]
F --> G[37℃孵育45分钟→洗板5次]
G --> H[加HRP二抗→避光显色]
H --> I[终止→450nm读数]