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绵羊卵泡抑素(FS)elisa试剂盒 |
以下是绵羊卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒的核心应用与技术规范总结(基于双抗体夹心法原理)12:
繁殖性能评估
检测母羊血清中FS水平(健康范围 15–40 ng/mL),评估卵巢储备功能;<15 ng/mL 提示卵泡发育迟缓或卵巢早衰风险,辅助优化配种时机13。
生殖疾病诊断
多囊卵巢综合征(PCOS)母羊血清FS显著降低(<10 ng/mL),联合雄激素水平分析可提升诊断准确性14。
肌肉发育研究
通过抑制肌肉生长抑制素(myostatin),FS异常升高(>50 ng/mL)与骨骼肌过度增生相关,用于良种肉羊选育研究15。
样本处理:
血清/血浆:3000×g离心10分钟,避免反复冻融(>3次活性损失>30%)27;
卵泡液:直接离心取上清,避免细胞碎片干扰5;
组织匀浆:生理盐水1:9(w/v)研磨后10,000×g离心7。
干扰规避:
溶血样本(Hb>0.2 g/dL)致假阴性,脂血样本(甘油三酯>150 mg/dL)需超速离心28。
标准品配制
冻干标准品复溶至 10,000 pg/mL主浓度,梯度稀释至 78–5,000 pg/mL(需换算单位)27。
显色控制
TMB显色终止后 15分钟内 读取OD值(450 nm),延迟导致吸光度非线性下降26;
浓缩洗涤液按1:20稀释,防止结晶堵塞洗板机管路78。
结果计算
样本最终浓度需乘以稀释倍数5(因加样时已预稀释)7。
注:该试剂盒仅用于科研(如畜牧繁殖力调控、肌肉发育机制研究),不可用于临床诊断17。
检测流程图
mermaidCopy Codegraph LR
A[样本采集] --> B{预处理}
B -->|血清/血浆| C[3000×g离心10分钟]
B -->|卵泡液/组织| D[离心或生理盐水匀浆]
C & D --> E[加样:10μL样本+40μL稀释液]
E --> F[37℃孵育60分钟→洗涤5次]
F --> G[加HRP二抗→TMB避光显色]
G --> H[终止→450nm读数]