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大鼠皮质类固醇11β脱氢同工酶2(HSD11B2)elisa试剂盒 |
大鼠皮质类固醇11β脱氢同工酶2(HSD11B2)ELISA试剂盒在科研中的核心应用与技术要点如下:
检测目标:
特异性定量大鼠HSD11B2蛋白浓度,典型检测范围为 0.094–156 ng/mL(部分试剂盒覆盖 25–800 pg/mL),灵敏度达 0.094 ng/mL47;
采用双抗体夹心法,通过酶标仪测定OD450值计算浓度24。
适用样本:
血清、血浆、组织匀浆液(肝脏/肾脏为主)、细胞培养上清液34;
溶血/高脂样本需3000 rpm离心20分钟去除干扰物45。
高血压模型:检测肾小管上皮细胞HSD11B2表达下调(如基因突变模型),揭示其通过减少皮质醇灭活导致假性醛固酮增多症及血压升高711;
妊娠期高血压:分析胎盘HSD11B2活性降低与皮质醇累积的关联性,探究胎儿程序化疾病起源11。
局部糖皮质激素活化:在肝脏/脂肪组织中定量HSD11B2,评估其对皮质酮向活性皮质醇转化的负向调节作用,关联胰岛素抵抗进程10。
甘草酸诱导模型:检测甘草酸抑制HSD11B2活性后皮质醇水平异常升高,评估药物性高血压风险11。
方法学要点:
预包被抗体捕获HSD11B2,HRP标记二抗催化TMB显色,显色需避光(≤15分钟),终止后30分钟内检测OD450值46;
冻干标准品需用稀释液复溶至10,000 pg/mL,再梯度稀释建立标准曲线6。
样本前处理:
组织匀浆:生理盐水稀释后1000×g离心10分钟取上清34;
保存条件:-70℃分装避免反复冻融,长期存放需添加蛋白酶抑制剂47。
干扰规避:
NaN₃禁用(抑制HRP活性);高浓度胆红素/血脂样本需超速离心预处理47。
该试剂盒是研究盐皮质激素紊乱(如高血压)、糖皮质激素局部代谢(胰岛素抵抗)及药物毒性(甘草酸)的核心工具710。应用时需严格把控样本前处理(如低温离心、避光显色),重点关注HSD11B2通过调节皮质醇灭活影响盐皮质激素受体活化的核心机制1011。