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大鼠葡萄糖激酶(GK)elisa试剂盒 |
大鼠葡萄糖激酶(GK)ELISA试剂盒在科研领域主要用于定量检测大鼠生物样本中的GK蛋白表达水平或酶活性,其核心应用方向及技术要点如下:
检测目标:
特异性定量大鼠GK浓度,典型检测范围 0.78–50 ng/mL,灵敏度最低可达 0.24 ng/mL912;
部分试剂盒可同时支持酶活性检测413。
适用样本:
血清、血浆、组织匀浆液(肝脏/胰腺)、细胞培养上清液、脑脊液等14;
溶血或高脂样本需离心预处理(3000 rpm离心20分钟)421。
量化糖尿病模型中肝脏和胰岛组织的GK表达变化,分析其在葡萄糖磷酸化及糖代谢调控中的作用34;
探究GK基因突变(如MODY2型糖尿病)与胰岛素分泌异常的关联性3。
检测胰岛β细胞GK活性,揭示葡萄糖浓度依赖性胰岛素释放的分子机制39。
评估降糖药物(如GK激活剂)干预后肝脏GK表达量或活性变化,验证药物对葡萄糖激酶通路的调节效应413。
分析高糖/高脂饮食模型中GK的动态变化,探究营养过剩对葡萄糖利用效率的影响13。
方法学原理:
双抗体夹心法ELISA:预包被抗大鼠GK抗体捕获目标蛋白,HRP标记二抗与TMB显色,浓度与450 nm吸光度(OD值)呈正相关14。
关键操作要求:
组织样本需生理盐水匀浆后离心(1000×g离心10分钟)取上清421;
避免反复冻融,推荐-70℃分装保存919。
样本前处理:
显色控制:TMB避光孵育≤15分钟,终止后30分钟内完成检测421。
性能参数:
灵敏度:最低检测限 0.24–0.34 ng/mL912;
精密度:板内/板间变异系数 CV < 10%912。
该试剂盒是研究糖代谢核心酶GK在糖尿病、胰岛素分泌及药物干预机制中的关键工具34。其应用需规范操作流程(如低温保存样本、避光显色),尤其在评估GK激活剂类药物时,可为葡萄糖激酶靶向治疗提供精准分子证据413。