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大鼠细胞色素P450 19(CYP19)elisa试剂盒 |
生殖内分泌研究:定量检测卵巢、睾丸等组织中芳香化酶(CYP19)表达,评估雄激素向雌激素的转化效率,解析性腺发育及生殖周期调控机制15;
疾病模型机制:在多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型中,分析酶表达异常与性激素失衡(如雌二醇/睾酮比值变化)导致的排卵障碍1617。
污染物效应评估:检测双酚A等环境干扰物对大鼠性腺CYP19活性的诱导或抑制作用,揭示其对生殖功能的损害机制915;
类雌激素物质验证:评估植物雌激素(如大豆异黄酮)通过上调芳香化酶表达产生的拟雌激素效应。
局部雌激素合成:在激素依赖性肿瘤(如乳腺癌)模型中,检测肿瘤组织CYP19高表达(↑1.5–2倍)与雌激素依赖性进展的关联816;
药物响应监测:联合芳香化酶抑制剂(如阿那曲唑)治疗,动态监测酶活性变化与疗效相关性814。
组织样本:液氮速冻,含1%蛋白酶抑制剂的PBS匀浆,16,000×g 4℃离心取上清13;
血液样本:肝素/EDTA抗凝血浆,采血后30分钟内分离,避免溶血(Hb<0.5 g/L)12;
保存条件:分装-80℃保存,冻融≤2次;长期保存添加0.1% BSA25。
mermaidCopy Codegraph TB A[标准品梯度稀释] --> B[加样50μL] B --> C[37℃孵育30-60分钟] C --> D[洗板5次+拍干] D --> E[加HRP二抗50μL] E --> F[37℃孵育30-60分钟] F --> G[洗板5次+拍干] G --> H[TMB显色≤15分钟] H --> I[2M H₂SO₄终止] I --> J[450nm读值]
注:
组织匀浆浓度超限时需预稀释(5–10倍)14;
显色严格计时,超时致OD值非线性漂移25。
功能联动:同步检测血清雌二醇(E₂)与睾酮(T)比值,佐证酶活性16;
分子关联:qPCR检测CYP19 mRNA,Western blot验证蛋白表达一致性1317。
环境干扰:双酚A暴露致大鼠卵巢CYP19表达↑2.1倍,引发E₂/T失衡及排卵紊乱15。
PCOS机制:PCOS模型大鼠卵巢酶活性↓40%,伴随高雄激素血症1617。
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安全规范:
强酸终止液接触皮肤需用5%碳酸氢钠冲洗12;
生物样本操作穿戴防护装备,液氮防冻伤13。
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生物学意义:
CYP19作为雌激素合成限速酶,通过调控性激素平衡影响生殖发育、内分泌稳态及肿瘤进程,是环境毒理学与肿瘤代谢研究的关键靶标89。