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大鼠中间α球蛋白抑制因子H3(ITIH3)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠中间α球蛋白抑制因子H3(ITIH3)elisa试剂盒

🔬 ‌检测原理与性能参数‌

  1. ‌双抗体夹心法原理‌
    预包被抗大鼠ITIH3抗体捕获样本中的抗原,加入酶标二抗(HRP标记)催化TMB显色,通过450nm吸光度(OD值)定量分析浓度13。

    • ‌灵敏度‌:0.1–0.25 ng/mL(主流国产品牌),部分进口试剂可达0.069 ng/mL37。

    • ‌检测范围‌:0.25–8 ng/mL(覆盖生理及病理浓度)34。

    • ‌精密度‌:板内/板间变异系数(CV)<10%39。

    • ‌特异性‌:与大鼠IL-1β、IL-6等炎症因子无交叉反应513。


🧪 ‌样本处理与保存‌

‌样本类型‌‌处理要求‌
‌血清‌室温凝固10–20分钟,3000 rpm离心10分钟,避免溶血19。
‌血浆‌EDTA/肝素抗凝,3000 rpm离心30分钟113。
‌组织匀浆‌PBS匀浆后离心取上清,建议添加蛋白酶抑制剂防止降解713。
‌细胞上清液‌3000 rpm离心10分钟去除颗粒物19。
‌保存条件‌分装后-20℃冻存,避免反复冻融;检测前室温平衡并混匀19。

⚠️ ‌关键提示‌:含NaN₃样本会抑制HRP活性,高脂血/溶血样本需预处理713。


⚙️ ‌操作流程要点‌

  1. ‌试剂保存‌

    • 未开封试剂盒:2–8℃避光保存(有效期6个月),TMB显色液严格避光17。

  2. ‌标准化步骤‌

    • 孵育温度:37℃恒温,时间60–90分钟(依品牌差异)16。

    • 洗涤要求:≥5次,每孔注满洗涤液以减少非特异结合39。

  3. ‌结果计算‌

    • 需同步检测标准曲线,建议样本与标准品均做复孔311。


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