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大鼠肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)elisa试剂盒

⚙️ 一、核心技术参数

‌参数‌‌指标‌
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:预包被抗大鼠TRAF6抗体捕获抗原,HRP标记二抗催化TMB显色13
‌检测范围‌‌0.25–8 ng/mL‌(常规型)或 ‌156.25–5000 pg/mL‌(高敏型)35
‌灵敏度‌‌≤0.25 ng/mL‌(最低检测限)或 ‌≤156.25 pg/mL‌(部分品牌)35
‌孵育时序‌37℃抗原捕获60分钟 → 洗涤 → HRP标记二抗37℃孵育30分钟 → TMB避光显色10–15分钟13

‌样本处理规范‌

‌样本类型‌‌关键步骤‌
‌血清/血浆‌EDTA/肝素抗凝 → ‌1000–3000×g离心15–20分钟‌,避免溶血或脂质残留13
‌组织匀浆‌按1:9(w/v)加预冷PBS(含蛋白酶抑制剂),冰上研磨 → ‌5000×g离心10分钟取上清‌13
‌保存条件‌‌-20℃分装冻存‌(长期需-80℃),反复冻融≤3次13
mermaidCopy Codegraph LR
A[样本预处理] --> B{类型}
B -->|血清/血浆| C[抗凝→离心]
B -->|组织| D[PBS匀浆→离心]
C & D --> E[稀释至线性范围]
E --> F[加样→37℃孵育60min]
F --> G[洗涤5次]
G --> H[加酶标二抗→37℃孵育30min]
H --> I[TMB避光显色10-15min]
I --> J[加终止液→450nm读值]

⚠️ ‌关键注意事项‌

  1. ‌干扰控制‌:

    • ‌禁用含NaN₃防腐剂‌(抑制HRP活性)14;

    • 高脂样本需 ‌10,000×g超速离心20分钟‌ 去除脂质干扰34;

  2. ‌操作要点‌:

    • 显色阶段严格避光,单孔加样时间差≤10分钟14;

    • 标准品需梯度稀释建立校准曲线18;

    • 洗涤不充分易导致假阳性,需彻底清洗5次14;

  3. ‌应用限制‌:

    • ‌仅限科研用途‌,不可用于临床诊断13;


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