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大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体2(TRAIL-R2)elisa试剂盒

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H-04-06-M05
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大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体2(TRAIL-R2)elisa试剂盒

以下为大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体2(TRAIL-R2)ELISA试剂盒的核心技术参数、操作规范及科研应用总结:


⚙️ ‌一、核心技术参数‌

‌参数‌‌指标‌
‌检测原理‌‌双抗体夹心法‌:预包被抗大鼠TRAIL-R2单抗捕获抗原,HRP标记二抗催化TMB显色 14
‌检测范围‌‌156.25–5000 pg/mL‌(高敏型)或 ‌0.625–20 ng/mL‌(常规型) 14
‌灵敏度‌‌≤156.25 pg/mL‌(最低检测限)或 ‌≤0.078 ng/mL‌(部分试剂盒) 15
‌孵育时序‌37℃抗原捕获60分钟 → 洗涤5次 → 酶标二抗37℃孵育30分钟 → TMB避光显色10–15分钟 47

‌样本处理规范‌

‌样本类型‌‌关键步骤‌
‌血清/血浆‌EDTA/肝素抗凝 → ‌2000–3000×g离心15分钟‌,避免溶血或脂质残留 13
‌组织匀浆‌按1:9(w/v)加预冷PBS(含蛋白酶抑制剂),冰上匀浆 → ‌5000×g离心10分钟取上清‌ 13
‌保存条件‌‌-20℃分装冻存‌(长期需-80℃),反复冻融≤3次 13
mermaidCopy Codegraph LR
A[样本预处理] --> B{类型}
B -->|血清/血浆| C[抗凝→离心]
B -->|组织| D[PBS匀浆→离心]
C & D --> E[稀释至线性范围]
E --> F[加样→37℃孵育60min]
F --> G[洗涤5次]
G --> H[加酶标二抗→37℃孵育30min]
H --> I[TMB避光显色10-15min]
I --> J[加终止液→450nm读值]

⚠️ ‌关键注意事项‌

  1. ‌干扰控制‌:

    • ‌禁用含NaN₃防腐剂‌(抑制HRP活性) 17;

    • 高脂样本需 ‌10,000×g超速离心20分钟‌ 去除脂质干扰 317;

  2. ‌操作要点‌:

    • 显色阶段严格避光,单孔加样时间差≤10分钟 47;

    • 标准品需梯度稀释(如0/62.5/125/250/500/1000 pg/mL)建立校准曲线 18;

    • 洗涤不充分易导致假阳性,需彻底清洗5次 814;

  3. ‌生物学意义‌:

    • TRAIL-R2通过结合死亡配体激活凋亡通路,调控肿瘤细胞程序性死亡及免疫应答 1319;


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