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大鼠转录激活因子-4(ATF4)elisa试剂盒 |
以下为大鼠转录激活因子-4(ATF4)ELISA试剂盒的核心技术参数、操作规范及科研应用总结:
内质网应激与疾病机制研究
定量检测血清、血浆、组织匀浆及细胞裂解液中ATF4水平,解析其在内质网未折叠蛋白反应(UPR)中的调控作用,关联神经退行性疾病、代谢性疾病及肿瘤模型的应激通路机制1219;
药物靶点验证
评估药物干预(如内质网应激诱导剂)对ATF4活化水平的调控效应19。
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A[样本预处理] --> B{类型}
B -->|血清/血浆| C[抗凝→离心]
B -->|组织| D[PBS匀浆→离心]
B -->|细胞上清| E[直接离心]
C & D & E --> F[稀释至线性范围]
F --> G[加样→37℃孵育60分钟]
G --> H[洗涤5次]
H --> I[加酶标二抗→37℃孵育30分钟]
I --> J[TMB避光显色10-15分钟]
J --> K[加终止液→450nm读值]⚠️ 关键注意事项
干扰控制:
禁用NaN₃防腐剂(抑制HRP活性)18;
高脂样本需 10,000×g超速离心20分钟 去除脂质干扰9;
操作要点:
显色阶段严格避光,单孔加样时间差≤10分钟89;
推荐≥3复孔,板内变异系数需<10%(板间<15%)38;
数据解读:
健康大鼠ATF4基础值缺乏统一标准,建议实验设立内参对照69;
应用限制:
仅限科研用途,临床诊断需专用验证试剂盒15。
性能对比
价格参考
96T规格:约1800元;48T规格:约1200元16。
安全提示:
终止液含 2M H₂SO₄8,操作需穿戴防护装备;开封酶标板需干燥剂密封保存614。
生物学意义:ATF4作为内质网应激核心转录因子,其表达水平直接反映细胞应对蛋白质错误折叠的应激能力,是神经退行性疾病及代谢紊乱研究的关键靶点1213。